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M15(pREP4) 感受態細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

產地：進口、國產

貨號：BK-G63291

發布日期： 2021-02-21
更新日期： 2025-06-04

發送咨詢信息

產品詳請

產地	進口、國產
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨號	BK-G63291
用途	產品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形態	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編號
保質期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀態	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規格	100ul10 100ul50
純度	%
是否進口	是

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

規格參數：

產品名稱：M15(pREP4) 感受態細胞
規格：100ul*10 100ul*50
分類：表達感受態細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項：

1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。

粘酸(>98%，BC)Mucic acid質量規格：>98%，BC 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA檢測試劑盒MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 96T/48T ELISAKitOH小鼠25羥基維生素D3規格：48T/96T

碲標準溶液(100μg/ml，基體:HCI)Tellurium standard質量規格：100μg/ml，基體:HCI 人衣原體抗體(Cpn-Ab)試劑盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-Ab ELISA Kit ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規格：96T/48T

銩標準溶液(1000μg/mL,基體：10%HCL)Thulium standard質量規格：1000μg/mL,基體：10%HCL RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規格：96T/48T 人基質金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒組裝/原裝

釩標準溶液(500mg/L,溶劑：水)Vanadium standard質量規格：500mg/L,溶劑：水 COLLAGENII蛋白共沉淀分析試劑盒5 小鼠膽酯轉移蛋白(CETP)試劑盒 Mouse cholest erolester ansfer protein,CETP ELISA Kit

Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISA試劑盒人β血小板球蛋白/β環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格：96T/48T 136849-88-2灰氈毛忍冬皂苷乙品牌 Macranthoidin B

小鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒，英文名： TGF-α ELISA Kit 16830-15-2積雪草苷規格 Asiaticoside

小鼠糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T 464-92-6積雪草酸 Asiatic acid

人抗SSB/La抗體試劑盒 Human ai-SSB/La aibody ELISA Kit 6902-91-6吉馬酮說明書 Germacrone

Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit兔子β血小板球蛋白/β環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格：96T/48T 357-70-0加蘭他敏品牌 Galanthamine

557-61-9二十八烷醇說明書 Octacosanol 豬血漿激肽釋放酶(KLKB1)試劑盒 Pig plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit

55750-84-0西紅花苷II說明書 Crocin II 豬血紅蛋白(Hb)試劑盒 Pig hemoglobin,Hb ELISA Kit

55576-66-4仙鶴草酚B規格 Agrimol B 豬性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 Pig von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit

555-66-86-姜烯酚 6-Shogaol 豬舒緩激肽(BK)試劑盒 Pig Bradykinin,BK ELISA Kit

55481-88-4大葉茜草素規格 Rubimaillin 豬生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA檢測試劑盒Porcineangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T

M15(pREP4) 感受態細胞操作方法：

1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。

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