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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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LLC-MK2細胞
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:E0070
  • 價格: ¥1760/株
  • 發(fā)布日期: 2020-10-07
  • 更新日期: 2025-06-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 E0070
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 胚胎;腎;自發(fā)永生
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁
物種來源 恒河猴
包裝規(guī)格 1×106
純度 詳見說明書%
是否進口

產(chǎn)品簡稱:LLC-MK2細胞
中文名稱:恒河猴腎細胞

規(guī)格:1×106

種屬:恒河猴

來源:胚胎;腎;自發(fā)永生

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):貼壁

單位:T25/

貨號:E0070

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

LLC-MK2細胞

1×106

E0070

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.
細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:21:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:31:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞**消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80冰箱內(nèi)過夜。
*
天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。 
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:

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小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISAKit     Diethyl 2-acetamido-2-phenethylmalonate  5463-92-3  中文名:  分子式:C17H23NO5  度:98.0%  關(guān)鍵詞:
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多烯紫杉醇三水(標準品)  Docetaxel trihydrate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 英文名稱HumanMMP-9ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鹽酸多奈哌齊III  Donepezil HCl  質(zhì)量規(guī)格:>99%,III 動物毛發(fā)DNA萃取試劑盒20

鹽酸多奈哌齊III(標準品)  Donepezil HCl  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 RatProgesterone,PROGELISA試劑盒大鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

達馬莫德  Doramapimod  質(zhì)量規(guī)格:含量>98.5%,類白色粉末 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1(HABP1)ELISA試劑盒 ,英文名: HABP1 ELISA Kit

鹽酸多佐胺;鹽酸杜塞酰胺  Dorzolamide HCl  質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31 Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA檢測試劑盒RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 96T/48T
CXCL3 Protein Human
重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白 (His 標簽)克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,MET抑制劑

Lncap clone FGC(人細胞) 5×106cells/瓶×2 AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-色氨酸DL-Tryptophan質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

盤羊皮膚細胞;ASHS2DL-絲氨酸DL-Serine質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于細胞培養(yǎng)

CD40 Others Canine CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) L-蛋氨酸;甲硫氨酸L-Mine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

軟骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)DL-苯丙氨酸DL-Phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>98,BR
LLC-MK2
細胞VSIG4 Others Human VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 金絲桃素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Hypericin

人骨骼肌成肌細胞RNAHSkMM miRNA5 μgD-葡萄糖-6-1酸質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進口原裝D-+-Glucopyranose 6-phosphate

ScaBER細胞,人膀胱鱗癌細胞 小鼠細胞,C26細胞 RLFs, 大鼠6-1酸葡萄糖三鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Gluconate 6-phosphate 3 salt 

L-O2(人正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2氨曲南質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BRAztreonam

NHEK.f single donor Pellet 正常人表皮角質(zhì)細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 小鼠顆粒細胞MGC氨曲南(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品Aztreonam
注意事項:
LLC-MK2細胞1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
4)點燃酒精燈:注意火焰不能太小;
5)嚴格的無菌操作;
6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

 


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