人破傷風抗體ELISA試劑盒操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

骨形態發生蛋白7抗體
β-連環蛋白/β-連環素/β鏈接素抗體
β-連環蛋白/β-連環素/β鏈接素抗體
乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體
血型抗原前體蛋白抗體
凱爾血型糖蛋白CD238抗體
嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體
骨形態發生蛋白10抗體
溴脫氧尿苷單克隆抗體（增殖標志物）
BEND2蛋白抗體
骨涎蛋白
副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體
BTBD6蛋白抗體
BMP內皮細胞調節蛋白抗體
丙肝病毒NS5A反轉錄蛋白8抗體
骨形態發生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切酶抗體
骨形態發生蛋白9抗體
微管蛋白β輔助因子D抗體
鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體
有絲分裂蛋白BUB3抗體
p60TRP蛋白抗體
博萊霉素水解酶抗體
短蛋白聚糖抗體